透析胎牛血清：制備與應用

胎牛血清是廣泛用于細胞培養基的重要成分，提供了多種生物活性物質，包括激素、生長因子、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子，以促進體外細胞培養。然而，在特定研究領域，透析胎牛血清也被用于滿足研究需求。下文將從生產工藝和應用方面對透析胎牛血清進行綜合介紹，以促進相關研究和應用的進行。

1. 透析胎牛血清的制備

a. 透析胎牛血清是基于普通胎牛血清進行特殊處理的產品。在制備過程中，普通胎牛血清需要經過嚴格的無菌處理，包括0.1微米膜三重過濾以及各項檢測，如理化性質（如滲透壓和pH值），成分（如內毒素和血紅蛋白）以及外源因子（如細菌、病毒和支原體），以確保其質量和安全性。

b. 透析胎牛血清的制備涉及透析過程，通過特定的透析膜在4°C下將血清透析在0.15M NaCl中。這個透析膜只允許小于10 kDa的小分子通過，這些小分子在滲透壓的作用下從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。透析的終止通常是當血清中葡萄糖濃度降至<5 mg/dL時，但透析過程還需要仔細監測pH值和滲透壓。

c. 透析過程采用切向流過濾，即流體與過濾方向垂直的過濾方式，以減小濾膜上的物質堆積，確保穩定的過濾速度。

2. 透析胎牛血清的應用

透析胎牛血清主要用于特殊研究領域，其中需要關注小分子濃度的應用，包括以下四個領域，它們有時相互交叉。

a. 同位素標記技術在細胞培養中的應用。

同位素標記技術，例如Stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC)，是一種基于質譜的蛋白質組學技術。它通過將13C或15N標記的氨基酸引入培養基，標記細胞內新合成的蛋白質，用于比較不同處理下的細胞蛋白質豐度。透析胎牛血清可用于排除天然氨基酸的干擾，以確保標記氨基酸的準確性。

b. 工程細胞株的篩選。

例如，CHO-DFGRˉ細胞株需要在培養基中添加次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸才能生存。透析胎牛血清可用作選擇培養基的一部分，以幫助篩選經過基因工程的細胞株。

c. 研究某些因子對細胞增殖和分化的影響。

透析胎牛血清可用于研究核苷酸、微量元素等對細胞的影響，以避免培養體系中的干擾物質。