支原體污染檢測的國際標準化進展，Venor®GeM支原體檢測助力研究

核酸擴增技術（Nucleic acid amplification technique，簡稱NAT）的應用正在逐漸取代基于培養(yǎng)的方法，成為細胞培養(yǎng)中檢測支原體污染的新選擇。德國MB公司生產(chǎn)的Venor®GeM qEP 支原體檢測試劑盒就是應用了NAT方法中的qPCR方法。

然而，不同的支原體NAT檢測方法之間，如檢測限和定量特性等，差異較大。為了協(xié)調(diào)支原體NAT檢測方法，生物參考材料的使用顯得尤為重要。為此，國際性可行性研究進行了多方參與的努力，涉及21個實驗室，采用26種定性、半定量或定量設計的NAT檢測方法，分析了四種遠緣相關的支原體物種（包括Acholeplasma laidlawii，Mycoplasma fermentans，M. orale，M. pneumoniae）的凍干制劑，并在不同濃度下進行了測試。

在一項研究中，發(fā)現(xiàn)使用M. fermentans制劑作為通用參考材料，可以有效降低試劑間的變異。于是，在進一步的可比性研究中，對該制劑進行了再生產(chǎn)和詳細的表征，并確認了其在不同NAT方法下的效價，以NAT可檢測單位（IU/ml）來表示。經(jīng)過世界衛(wèi)生組織（WHO）生物標準化專家委員會（ECBS）的認證，該制劑被正式確定為“第一個世界衛(wèi)生組織國際標準，用于基于核酸擴增技術的通用支原體檢測"（WHO Tech Rep Ser 987:42, 2014），其效價為200,000 IU/ml。

相關研究發(fā)表在《Appl Environ Microbiol》上，文章標題為：“World Health Organization International Standard To Harmonize Assays for Detection of Mycoplasma DNA"。

目前，這一世界衛(wèi)生組織國際標準已經(jīng)成為支原體NAT檢測方法的重要參考制劑。它不僅可用于評估NAT檢測方法的分析靈敏度，還可用于定量檢測方法的單位化校準，并對支原體檢測領域的監(jiān)管要求進行規(guī)定。這標志著支原體污染檢測在國際標準化方面取得了重要進展，將為該領域的研究和應用提供更加統(tǒng)一和可靠的基準，進一步促進細胞治療產(chǎn)品的安全和有效應用。