支原體的檢測(cè)方法之qPCR法

在實(shí)驗(yàn)室的工作中，支原體污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使生物制藥工業(yè)產(chǎn)品的合格率下降。故對(duì)其的檢測(cè)非常重要。支原體的檢測(cè)方法有很多，培養(yǎng)法、DNA染色法、ELISA法，qPCR法等等。但是我們今天我們重點(diǎn)講一講qPCR法。

qPCR，顧名思義，就是在PCR的基礎(chǔ)上加入熒光基團(tuán)，通過熒光信號(hào)的變化的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR的反應(yīng)過程，最后通過對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

熒光定量PCR法的出現(xiàn)，極大地簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過程。它具有以下幾大特點(diǎn)：

1.時(shí)間短，2-3小時(shí)即可出結(jié)果；

2.靈敏度高、特異性強(qiáng)；

3.檢測(cè)結(jié)果可定量；

4.操作簡(jiǎn)便，一臺(tái)機(jī)器即可

在和被喻為“金標(biāo)準(zhǔn)"的培養(yǎng)法的比較中。qPCR法檢測(cè)的時(shí)間短，只需兩個(gè)半小時(shí)左右即可出其結(jié)果；培養(yǎng)法在分離培養(yǎng)中，雖然是支原體檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)"，但是在支原體分離培養(yǎng)的過程中，要長(zhǎng)出明顯克隆需要7-29天，時(shí)間長(zhǎng)而且操作較為復(fù)雜，沒有辦法滿足實(shí)驗(yàn)的需求。

在此特別為大家推薦德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒，它具有高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種，操作簡(jiǎn)單，易于觀察，而且具有高靈敏度，最高檢測(cè)可達(dá)到≤10CFU/ml。