胎牛血清中的外泌體參與細胞的增殖

外泌體（Exosome）是近年研究的熱點，它是新發現的一種細胞通訊的形式。外形上看，它是30-150nm的小囊泡，里面卻攜帶著多種蛋白質、RNA和脂類等重要信息。

它由活細胞分泌，進入到血清、唾液、尿液、羊水等多種生物體液中，進而影響鄰近或遠處的細胞。

 

圖. 外泌體作為一種小囊泡，參與細胞間的通訊。

圖片來自：Graça Raposo.Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and friends.J Cell Biol. 2013 Feb 18; 200(4): 373–383

胎牛血清是常用的細胞培養基添加成分，它富含多種營養，滿足細胞粘附、生長、增殖、解毒等需求。胎牛血清中也含有外泌體，并可能對所培養細胞具有一定作用。

2020年，有文獻報道了胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起促進作用，則確證了血清中的外泌體確實在細胞培養中發揮一定的作用。（文獻1）

該實驗的研究設計如下：

一、外泌體的提取和確證

取15 mL胎牛血清，通過超速離心100000xg獲得外泌體，0.22μm過濾清洗后，將外泌體溶于100μlPBS中。并進行透射電子顯微鏡觀察，以及后期WB檢測標志蛋白確證。

二、細胞培養

小鼠胚胎成骨前體細胞MC3T3-E1細胞，前期用含10%胎牛血清的α-MEM培養液培養，傳代。選取狀態良好的第3代細胞用于后續實驗。

三、細胞分組培養

對照組：胎牛血清（不含外泌體）+ α-MEM

外泌體組：在以上基礎上另加入10 mg/L胎牛血清外泌體。

四、細胞檢測

用CCK-8檢測細胞增殖，WB檢測細胞骨形態發生蛋白2、骨橋蛋白。

結果顯示，24h后，外泌體組細胞增殖明顯高于對照組。同時，促進成骨的蛋白因子，如骨形態發生蛋白2和骨橋蛋白的表達水平明顯增高。

作者指出：胎牛血清外泌體對成骨細胞的增殖起到促進作用，可為臨床治療骨破壞提供新思路。同時，國外的研究表明，使用祛除外泌體的胎牛血清培養細胞，大多數細胞的生長速率均降低，提示血清中的外泌體在細胞生長及存活方面起到一定的作用（文獻2）。

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